Question

Se um fragmento pequeno de DNA, como um plasmídeo, é cortado por uma enzima de restrição, os poucos fragmentos produzidos podem ser observados como bandas distintas em um gel de eletroforese. Ao contrário, se o DNA genômico de uma célula é cortado por uma enzima de restrição, são produzidos vários fragmentos de diferentes tamanhos. O genoma humano, com 3,2 bilhões de pares de bases, geraria mais de 12 milhões de fragmentos quando cortado por uma enzima de restrição. Separado por eletroforese e corado, este grande conjunto de fragmentos apareceria como um esfregaço contínuo no gel por causa da presença de tantos fragmentos de diferentes tamanhos. Uma possibilidade é usar uma sonda, uma molécula de DNA ou RNA com uma sequência de base complementar a uma sequência no gene de interesse. Para usar uma sonda, primeiro o pesquisador corta o DNA em fragmentos ao usar uma ou mais enzimas de restrição e então separa os fragmentos com eletroforese em gel. A seguir, os fragmentos separados serão desnaturados e transferidos para um meio sólido permanente (como nitrocelulose ou membrana de náilon). Após os fragmentos de DNA de fita única serem transferidos, a membrana é colocada em uma solução de hibridização de uma sonda marcada. A sonda se ligará a qualquer fragmento de DNA na membrana que tenha as sequências complementares. A membrana é lavada para remover qualquer sonda não ligada, e um método bioquímico revela a presença de sonda ligada (adaptado de PIERCE, 2016). Assinale a alternativa correta que representa a técnica descrita: Escolha uma: a. Southern blotting. b. Northern blotting. c. Western blotting. d. Cariotipagem espectral. e. Hibridização genômica.

Answer 1

Resposta correta:

Letra "a" - Southern blotting