Questão 9
Ques
João trabalha em um laboratório de genética e irá realizar um protocolo de extração de DNA vegetal, como
proposto por Doyle & Doyle, em 1987. Durante a realização de algumas fases do protocolo, João utilizou
aos seguintes reagentes:
(1) Tris HCI
(2) EDTA
(3) PVP
A respeito dos reagentes utilizados na PCR é correto afirmar que:
А.
oo Tris HCI reduz a contaminação da amostra por polissacarídeos.
В.
O PVP auxilia na precipitação do DNA no final do processo
Tempo
O EDTA promove a lise célula,
Sim
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Resposta:
Os reagentes Tris HCL mantém o pH da solução constante, o EDTA inibe atividade de DNAses e o PVP protege o DNA contra agentes oxidantes.
Explicação:
Durante a extração de DNA, alguns reagentes são utilizados como etapas fundamentais do processo, tais como:
Tris HCL: utilizado com o objetivo de manter o pH da solução constante além de evitar a ação de nucleases que podem degradar o DNA.
EDTA: inibe a atividade de DNAses atuando como agente quelante de íons essenciais para a ação dessa enzima.
PVP (polivinilpirrolidona) é um agente anti-oxidante que protege o DNA contra a ação de compostos fenólicos e polissacarídeos, os quais podem oxidar o DNA de forma irreversível.
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