Question

Desde a sua descoberta, a infecção pelo Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) tem sido diagnosticadalaboratorialmente com o uso de ensaios imunoenzimáticos. Inicialmente, a partir de 1985, essesensaios empregavam antígenos virais, obtidos a partir da lise viral em cultura de células, os quais eramimpregnados em uma fase sólida para detecção de anticorpos anti-HIV, denominados atualmente deimunoensaios de primeira geração. Na década de 1990, a variabilidade do HIV já era evidente, o quedemandou o desenvolvimento de testes mais sensíveis e específicos, aprimorados em vários aspectostécnicos, até o ELISA (do inglês Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) de quarta geração, utilizado emambiente laboratorial até os dias atuais.Considerando as informações apresentadas sobre a evolução dos ensaios imunoenzimáticos, faça o quese pede nos itens a seguir.a) Cite duas vantagens dos imunoensaios de quarta geração em comparação aos de primeira geração.b) Descreva as etapas do teste ELISA de quarta geração. c) Descreva a conduta recomendada para a confirmação do resultado em caso de teste ELISA positivopara anti-HIV

#ENADE

Answer 1

a)

Dentre as vantagens dos imunoensaios de quarta  geração em comparação aos de primeira geração podemos citar:

• Redução do tempo da janela imunológica;
• Detecção de anticorpos da classe IgM.

b)

O teste ELISA consiste nas seguintes etapas:

• Fase sólida, na qual estão fixados anticorpos e antígenos;
• presença de anticorpos e antígenos detectada na amostra por meio adição de soluções  conjugadas a uma enzima;
• revelação da reação feita através da adição de um substrato/cromógeno, que resultará  na formação de cor, indicando a presença de antígenos ou de anticorpos na amostra;
• a intensidade da cor é medida com ajuda de um espectrofotômetro lido em comprimento de onda, conforme indicação da bula do teste;
• cálculo do ponto de corte (cut off), em que as reações são interpretadas como reagentes, não  reagentes ou indeterminadas.

c)

Se faz necessário a confirmação do resultado com a realização de  testes mais específicos, como o teste da imunofluorescência e do Western Blotting.

Espero ter ajudado, bons estudos.