Biblioteca de DNA é o conjunto dos fragmentos de restrição de DNA clonados de um organismo, adquirido a partir de enzimas que realizam o corte do material genético. Quando obtemos toda a sequência de DNA de um organismo é formada a "Biblioteca Genômica" A triagem (screening) de uma biblioteca genômica costuma empregar:
A.
PCR de colônia e análise das sequências dos produtos.
B.
Sondas de RNA que hibridizam com os mRNAs produzidos pelas colônias e que foram previamente capturados por blot em membrana de nylon.
C.
Clivagem do inserto de cada colônia por enizmas de restrição e análise do tamanho do fragmento em gel (northern blot).
D.
Anticorpos que reconhecem proteínas recombinantes produzidas pela célula hospedeira, fixando-se sobre as colônias em placas contendo meio nutriente sólido.
E.
Sondas de DNA que hibridizam com o inserto do plasmídeo, em membrana de nylon obtida como réplica de placa de Petri contendo colônias de bactérias.
Soluções para a tarefa
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Resposta:
Letra E
Explicação:
Passos da triagem de uma biblioteca genômica:
1-plaqueamento de uma alíquota da biblioteca em placas
2- cobrir a placa de Petri com uma membrana de nylon
3-remoção da membrana
4-lise das bactérias (vapor de clorofórmio seguida imersão membrana em solução de SDS e lisozima)
5-desnaturação do DNA (aquecimento 85-90 oC)
6- adição da sonda
7-lavagem da membrana
8-exposição a um filme de raio X
9-revelação do autoradiograma
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