1. DEFINA cadeia de custódia e DISCUTA a sua importância.
2. DESCREVA os eventos que ocorrem na cadeia de custódia externa e interna.
2. LISTE os diferentes vestígios biológicos que podem ser encontrados em uma cena de crime e, posteriormente utilizados para identificação do perfil genético de um suspeito.
3. DESCREVA as três etapas do processo da reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizada para amplificar e gerar cópias de fragmentos do DNA de interesse.
4. CITE os diferentes tipos de PCR.
5. ELABORE um fluxograma contendo os passos do processo de identificação das amostras de DNA encontradas em uma investigação criminal
Soluções para a tarefa
Resposta:
MAPA - SAÚDE - BIOLOGIA MOLECULAR E FORENSE - 52/2022
Em todas as cenas de crime é possível encontrar diversos tipos de vestígios biológicos, a partir dos quais, testes de DNA podem ser realizados, cabendo ao perito identificar o tipo de amostra encontrada e qual melhor técnica de identificação a ser empregada. Em relação a esse assunto e diante do caso acima relatado, faça o que se pede:
1. DEFINA cadeia de custódia e DISCUTA a sua importância.
Resposta:
A cadeia de custódia é o conjunto de procedimentos utilizados para garantir a rastreabilidade e confiança de um vestígio, sendo iniciada com a preservação do local de crime e se estendendo por todas as etapas desde a coleta, transporte e recebimento do vestígio.
2. DESCREVA os eventos que ocorrem na cadeia de custódia externa e interna.
Resposta:
A cadeia de custódia é composta por duas fases: Fase externa seria o transporte do local de coleta até a chegada ao laboratório. Fase interna, refere-se ao procedimento interno no laboratório, até o descarte das amostras.
2. LISTE os diferentes vestígios biológicos que podem ser encontrados em uma cena de crime e, posteriormente utilizados para identificação do perfil genético de um suspeito.
Resposta:
sangue, fezes, saliva, esperma, escarro, vomito, cabelo.
3. DESCREVA as três etapas do processo da reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizada para amplificar e gerar cópias de fragmentos do DNA de interesse.
Resposta:
Desnaturação.
O DNA genômico contendo a sequência a ser amplificada é desnaturado por aquecimento a cerca de 95°C por cerca de 30 segundos. ...
Anelamento ou hibridização.
Após a separação das fitas, um par de iniciadores ou primers (uma fita de DNA específica para o gene que se quer estudar) complementam a fita oposta da sequência de DNA a ser amplificada. Ou seja, um deles é complementar à sequência em uma fita da dupla-hélice de DNA e o outro é complementar à sequência na outra fita. O molde é determinado pela posição dos iniciadores que se anelam a fita. Essa etapa ocorre a uma temperatura de 60°C.
Extensão ou polimerização.
Com o molde já identificado, a enzima DNA-polimerase adiciona as bases complementares, formando uma nova fita e então tem-se novamente a duplicação da fita de DNA. Esse processo acontece a uma temperatura de 72°C.
O ciclo inteiro é então reiniciado, os produtos do primeiro ciclo de replicação são então desnaturados, hibridizados e novamente replicados com DNA-polimerase. O procedimento é repetido muitas vezes até que o nível desejado de amplificação seja obtido.
Na prática, a amplificação efetiva do DNA requer de 20 a 30 ciclos de reação, com os produtos de cada ciclo servindo como DNA-molde para o próximo – dando origem ao termo “reação em cadeia” da polimerase.
Como cada etapa da reação ocorre em uma temperatura específica, a reação pode ser controlada. É utilizado um termociclador para determinar a temperatura e o tempo de cada etapa, bem como o número de ciclos de replicação.
A detecção do produto de amplificação normalmente é feita em eletroforese em gel de agarose, que é corado com brometo de etídio, permitindo a visualização direta do DNA pesquisado. Hoje, existem termocicladores que, além de amplificar o DNA, permitem a sua detecção – chamada PCR em tempo real (qPCR).
4. CITE os diferentes tipos de PCR.
Resposta:
PCR convencional;
RT-PCR;
Multiplex PCR;
Nested PCR;
PCR isotérmico;
5. ELABORE um fluxograma contendo os passos do processo de identificação das amostras de DNA encontradas em uma investigação criminal.
Resposta:
observação do Vestigio;
coleta;
mapeamento;
transporte;
análise;
Com relação a Cadeia de Custódia e PCR, temos:
1. São procedimentos realizados com o objetivo de preservar as provas de um crime, separados em ordem cronológica.
2. A fase externa da cadeia de custódia consiste no deslocamento das provas do local de coleta até o laboratório. Já a fase interna é todo o procedimento realizado no laboratório.
3. Desnaturação, anelamento e extensão.
4. PCR convencional, PCR Multiplex, PCR Nested, PCR isotérmico e RT-PCR.
5. Observação e identificação dos vestígios criminais ⇒ coleta dos vestígios ⇒ organização ⇒ mapeamento ⇒ fase externa: transporte ⇒ fase interna: análise dos vestígios em laboratório
Vamos entender melhor.
Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)
O PCR é um procedimento genético realizado com uma amostra de DNA que é amplificada bilhões de vezes com o objetivo de realizar a análise desse material genético. Suas etapas são:
- Desnaturação: o DNA é submetido a uma alta temperatura (96°C), desnaturando a fita e separando-a em duas.
- Anelamento: primers se ligam as sequências complementares após o resfriamento a 55°C - 65°C.
- Extensão: o aquecimento da reação até 72°C favorece a ação da enzima Taq Polimerase que adicionará nucleotídeos à cadeia amplificada.
O PCR pode ser usado para diversas análises dentro da Biologia Forense, entre elas, a identificação de vestígios criminais, sendo possível traçar o perfil genético do suspeito.
Para isso, são coletadas amostras de sangue, cabelo, saliva e dentre outros materiais biológicos do criminoso.
Essa técnica é realizada na segunda etapa/fase interna da Cadeia de Custódia, onde os dados são analisados em laboratório. A partir dos resultados e análise dos outros dados coletados na fase externa, é possível se chegar a conclusões a respeito do crime.
Aprenda mais sobre PCR em: brainly.com.br/tarefa/52654370
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