Qual a importância da água morna na extração de DNA
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se o tubo e todo o liquido ali dentro estivessem gelados, e a agua morna/quente for dispejada/depositada , causa um choque térmico, n tenho certeza, mas acho q é isso
nathleme123:
Mas não entendo, o que faz esse choque térmico no procedimento?
A atração do DNA pelas células bacterianas, em condições naturais, é um evento muito raro, devido à ocorrência da repulsão eletrostática entre as cargas negativas dos fosfolípideos da membrana e as cargas negativas dos grupamentos fosfatos da molécula de DNA...
Para a transformação bacteriana, podem-se utilizar dois diferentes métodos de transformação: Choque térmico - Comumente chamado transformação com cloreto de cálcio, é um método fácil e relativamente barato de transformação. Consiste na preparação das células, para torná-las competentes, por tratamento com cloreto de cálcio ou outro íon divalente (cloreto de lítio ou magnésio).
Os íons atuam neutralizando as cargas negativas da membrana e do DNA. Após um choque térmico na temperatura de 37º a 42ºC, criamse poros na membrana e o DNA pode alcançar o interior da célula
Eletroporação - É um método mais eficiente para transformação de células com DNA plasmidial. Consiste, inicialmente, na preparação das células com uma solução aquosa para torná-las competentes e aptas a receber o DNA. As células são submetidas a alta voltagem (choque elétrico) que provoca uma desestabilização da membrana externa e a formação de poros, possibilitando a entrada do DNA para o interior da célula. Esse tipo de transformação, que requer um equipamento
denominado eletroporador -, pode ser utilizado para a transformação de bactérias gram positivas e negativas, leveduras, fungos filamentosos, células animais e vegetais. O eletroporador deve ser ajustado para cada tipo celular, considerando os seguintes parâmetros: capacitância, intensidade e duração do pulso elétrico
acho q agr dá pra entender melhor
Obrigada!!!
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