Question

Quais são as etapas para obtenção do DNA?

Answer 1

Bom dia.

A extração de DNA (ácido desoxirribonucleico) é um processo com várias aplicações científicas vitais. Em pesquisa e na medicina, seus usos incluem sequenciamento de DNA, detecção de vírus e bactérias e a investigação de doenças e disturbios de origem genética. No campo da ciência forense, é utilizada para a identificação dos mortos e dos vivos, bem como para a análise da cena do crime. Apesar de seus resultados sofisticados, a extração de DNA em si é bastante simples, e técnicas de extração básicas funcionam igualmente bem em um laboratório de pesquisa ou em casa.

A extração de DNA inicia-se com a aquisição de uma amostra de DNA. Como todos os organismos vivos contêm DNA, as opções de amostra disponíveis são praticamente infinitas, e a escolha geralmente está relacionada diretamente ao indivíduo em estudo. DNA humano é de facilmente obtido, esfregando-se o interior da bochecha de uma pessoa com um cotonete. As amostras de plantas podem ser obtidas cortando-se uma secção do material de origem.

- As extrações em laboratório ocorrem da seguinte forma :

Quando a amostra é obtida, ela deve ser dividida, para obter o material genético do interior das células individuais.

No laboratório, a amostra é geralmente colocada em um dispositivo chamado tubo de Eppendorf. Uma solução especial é então adicionada ao tubo, e ele é colocado em um banho de água morna.

O objetivo da solução é de lisar (quebrar) a estrutura celular do material. Ela contém dois ingredientes essenciais: um detergente especialmente concebido e uma enzima, a proteinase K. Uma vez no banho de água quente, o detergente corrói a membrana celular da amostra, bem como a membrana nuclear em torno do material genético da célula.

Uma vez que estas membranas são rompidas, a proteinase K rompe uma proteína chamada histona, que está enrolado em torno do DNA.

O tubo Eppendorf é então removido do banho de água, e uma solução salina concentrada é adicionada, para acumular as proteína não desejadas e os restos celulares.

O tubo é então colocado numa centrífuga pequena, onde a força centrífuga deixa o DNA difundido em uma camada de solução, acima o material mais pesado em excesso.

O DNA é então removido e colocado por sozinho em um outro tubo. O álcool isopropílico é adicionado ao DNA e misturado cuidadosamente. Esse processo obriga o DNA a sair da solução, e a aglomerar-se em fios visíveis.

O material é então colocado na centrifugação novamente, para forçar as cadeias de DNA a se juntarem. O álcool é removido e o DNA é colocado para secar.

Uma vez que este processo esteja completo, a amostra de DNA resultante pode ser armazenada e utilizada para qualquer uma das suas muitas finalidades.






Espero ter ajudado e bons estudos.