O método de Sanger baseia-se em uma reação de sequenciamento com utilização de didesoxinucleotídeos (ddNTPs) marcados com fluorescência, além de dNTPs.
Assinale a alternativa CORRETA:
a.
A reação é realizada com apenas um oligonucleotídeo iniciador e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), na qual os dNTPs encontram-se em maior quantidade do que os ddNTPs e a leitura da sequência no gel de poliacrilamida é feita de baixo para cima (sentido 5’-3’ da fita nascente).
b.
A reação é realizada com apenas um oligonucleotídeo iniciador e uma mistura de nucleotídeos terminadores que interrompem a polimerização (dNTPs). A leitura da sequência é realizada de cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente).
c.
A reação, diferentemente da PCR, não necessita de um oligonucleotídeo iniciador, usando uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs). A leitura da sequência é realizada de cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente).
d.
A reação é realizada com dois oligonucleotídeos iniciadores e uma mistura de nucleotídeos dNTPs e ddNTPs, na qual os ddNTPs encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs.
e.
A reação é realizada com dois oligonucleotídeos iniciadores e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), na qual os ddNTPs encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs e a leitura da sequência é realizada de cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente).
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Resposta: letra a.
A reação é realizada com apenas um oligonucleotídeo iniciador e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), na qual os dNTPs encontram-se em maior quantidade do que os ddNTPs e a leitura da sequência no gel de poliacrilamida é feita de baixo para cima (sentido 5’-3’ da fita nascente).
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