Na década de 1960, demonstrou-se que a transcrição é regulada por proteínas que se ligam a seqüências específicas do
DNA. Em 1983, Dynan e Tjian mostraram que uma proteína de núcleo de células humanas, chamada Sp1, era capaz de se
ligar a uma destas seqüências e promover transcrição in vitro. Para prosseguir os estudos e determinar o mecanismo de
ação de Sp1, era necessário obter esta proteína em estado puro. O problema é que Sp1 representa cerca de 0,001% do
total de proteínas celulares. Para purificar a proteína Sp1 pela primeira vez um procedimento adequado seria
(Adaptado de W. S. Dynan e R. Tjian. The promoter-specific transcription factor Sp 1 binds to upstream sequences in the SV40 early promoter.
Cell. v.35, n. 1, p. 79-87, 1983)
(A)cromatografia de afinidade com a seqüência de DNA correspondente.
(B) immunoblotting usando anticorpo primário contra Sp1.
(C)cromatografia de afinidade usando anticorpo contra Sp1.
(D)PCR (polymerase chain reaction).
(E)cromatografia de troca iônica.
Soluções para a tarefa
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A alternativa A) é a correta.
Para purificar a proteína Sp1 pela primeira vez um procedimento adequado seria a cromatografia de afinidade com a seqüência de DNA correspondente.
A purificação de proteínas é um processo importante, principalmente na industria farmacêutica e na industria de enzimas sintéticas.
Os aminoácidos são os monômeros que formam as proteínas, que são as principais biomoléculas do corpo, já que fazem quase tudo no organismo, quase todas as funções do corpo são desempenhadas por proteínas que são sintetizadas a partir da leitura do código genético, o DNA.
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Resposta:
Confirmado!
Explicação:
(A)cromatografia de afinidade com a seqüência de DNA correspondente.
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