Question

EXPLIQUE o método (citando as etapas) de estudo histológicos e citológicos.

Answer 1

MÉTODOS PARA O ESTUDO DAS CÉLULAS E DOS TECIDOS - Níveis de organização dos seres humanos: Organismo Sistemas Órgãos Tecidos Células e matriz extracelular (aquilo que as células produzem) * Os itens grifados serão objetivo de estudo da histologia, os quais se caracterizam como elementos microscópicos. Já os demais serão estudados na anatomia, tendo em vista que possuem característica macroscópica. - Unidades de medida em biologia: 1mm/1000 = 1 micrômetro (\u3bcm) 1\u3bcm/1000 = 1 nanômetro (nm) = 10 angtrons (Å) - Confecções de lâminas histológicas/ preparados hitológicos permanentes: 1º Coleta da amostra, processo realizado com máximo cuidado, evitando ao máximo danificações. 2º Fixação, através de fixadores, dentre os quais o mais utilizado é o formaldeído 4% (formol) São finalidades da fixação: conferir estabilidade química ao tecido/ endurecer o tecido para manipulações posteriores/ diminuir a autólise (destruição de tecido vivo ou morto por enzimas e células do próprio organismo; autodigestão)/ diminuir a putrefação bacteriana/ aumentar a capacidade de coloração e(ou) reação. * 3º Desidratação, através de um processo realizado com a amostra onde essa é mergulhada por cerca de uma hora em frascos contendo etanol 70 volume, 80, 90, 95, 100, 100 e 100, respectivamente. Assim, ao final do processo, a amostra se encontra totalmente desidratada, porém o álcool ainda não se mistura com a parafina, tendo de ocorrer o processo a seguir. 4º Diafanização ou clareamento, um processo muito semelhante ao de desidratação, porém realizado com o intuito de garantir que a parafina adentre futuramente na amostra, essa é mergulhada por cerca de uma hora em frascos contendo xilol 50 volume, 100, 100 e 100, respectivamente. 5º Impregnação pela parafina, a parafina é aquecida em uma estufa até os 56 graus, assim que ela atinge sua forma liquída a amostra é mergulhada nela, calor causa a evaporação do solvente orgânico, e os espaços existentes dentro dos tecidos tornam-se preenchidos com parafina, esse processo também ocorre 3 vezes para garantir a total penetração da parafina. 6º Inclusão ou emblocamento da parafina, mais parafina é colocada em moldes metálicos, os quais também são aquecidos na estufa, em seguida a amostra é mergulhada na solução onde passa cerca de um dia, garantindo que a parafina fique totalmente sólida. 7º Microtomia, a amostra emblocada pela parafina é colocada no macrótomo, onde vira a ser cortada em fatias de 5 \u3bcm, garantindo assim que a espessura não seja mais um problema, após o corte a amostra é colocada em banho-maria em recipientes contendo água a 37º 8º Montagem do corte histológico, mergulhando uma lâmina de vidro cuidadosamente no recipiente onde o corte histológico se encontra em banho maria, e logo em seguida a retirando da água com o corte nela aderido. 9º Coloração,antes do processo de coloração a lâmina histológica deve ser mergulhada em xilol 100 volume, 100 e 50 respectivamente, em seguida em etano+xilol, e depois em etanol 100 volume, 95, 90 e 70 (isso ocorre pois os corantes não se misturam com a parafina, e sim com a água). Após tudo isso a lâmina é mergulhada nos corantes, primeiro na hematoxilina (H), apresenta caráter básico e cor roxa, e em seguida na eosina (E), a qual possui caráter ácido e cor rosa, logos depois de cada imersão no corante a lâmina é mergulhada em água para tirar o seu excesso. Após a coloração a lâmina é submetida novamente aos produtos responsáveis pela desidratação. 10º Proteção dos cortes histológicos, uma lâmina de proteção super fina é colocada sobre a lâmina histológica, e fixada com uma cola. *Quando o orgão possui um tecido duro (como o osso) é realizado o processo de desmineralização, onde a amostra é mergulhada em ácido etilenodiamino tetracético, garantindo que os outros processos venham ocorrer de forma adequada. MÉTODOS DIVERSOS - Fixação física por congelamento: esse método é deveras utilizado em meio a ambientes hospitalares, geralmente em casos urgentes, onde o paciente precisa de uma análise histológica o quanto antes possível. As amostras são congeladas pelo gelo seco, e o aparelho utilizado para realizar os cortes histológicos é denominado micrótomo de congelação ou ainda o criostato (que possui uma camara fria), dpois de congelados e seccionados o processo é semelhante ao da fixação padrão. esse corte não é usado fora dos ambientes hopitalares devido ao fato de não possuir precisão como a fixação padrão. - Citologia esfoliativa: é um processo rápido, pois pula a etapa de corte. Coleta-se o material com uma espécie de escova, a qual é esfoliada sobre a área da amostra, em seguida a escova é esfregada em uma lâmina de vidro, transferindo para esta as células que virão a ser analisadas, essas lâminas são geralmente colocadas em um recipiente contendo fixação do tipo álcool-éter. o resto do processo é semelhante aos demais, contendo a coloração e a analise em microscópio óptico.