como pode ser verificado ou quantificado o crescimento de bacteriófagos em meio de cultivo?
Soluções para a tarefa
O crescente surgimento de resistência bacteriana aos antibióticos convencionais é
um grave problema que precisa ser enfrentado, seja pela descoberta de novas
substâncias antimicrobianas, naturais ou sintéticas, ou através da pesquisa de
terapias alternativas que sejam economicamente acessíveis. A terapia de fagos é
uma dessas alternativas. Trata-se de uma forma de controle biológico, baseado
em vírus específicos que infectam e destroem células bacterianas: os
bacteriófagos. No entanto, esta é uma fonte terapêutica ainda pouco explorada.
Esse trabalho utilizou o cultivo, isolamento e sequenciamento do genoma, além de
técnicas de genômica de alto desempenho para isolar e caracterizar o genoma de
bacteriófagos específicos para a linhagem enteroinvasiva de Escherichia coli
ATCC 43893, visando o entendimento e a definição do ciclo de infecção desses
vírus (líticos ou lisogênicos). A metodologia utilizada nessa pesquisa possibilitou o
isolamento de 12 vírus. 8 diferentes linhagens virais tiveram seu material genético
extraído e purificado, apresentando bom rendimento e quantidade reduzida de
DNA bacteriano contaminante. O sequenciamento do genoma desses 8 vírus foi
realizado usando a plataforma de nova geração MiSeq. Foi analisada a
diversidade genética desses bacteriófagos e verificou-se que são vírus da ordem
Caudovirales, sendo 2 da família Siphoviridae e 6 da família Myoviridae. Apenas
um deles mostrou potencial de ter ciclo lisogênico, os outros sete vírus não
continham nenhum gene que sugerisse isso. Entretanto, apesar dos bacteriófagos
isolados não terem apresentado genes relacionados ao ciclo lisogênico, análises
mais aprofundadas devem ser realizadas para comprovar que são realmente
exclusivamente líticos, já que muitos não apresentam seu genoma completo e
mais de 50% dos genes anotados não têm função definida
Fim,espero ter te ajudado.