Question

Como feita a identificação do DNA?

Answer 1

As principais técnicas na identificação do DNA são:

• Eletroforese

A eletroforese é uma técnica por meio da qual é feita a separação das moléculas do material genético em função da sua massa (tamanho), forma e compactação. É uma técnica rápida, sensível e precisa.

O procedimento da eletroforese consiste na migração da molécula em questão em suportes (géis) por ação de uma corrente elétrica, com diferentes velocidades, dependendo do seu tamanho e forma. Quando submetidas a um campo elétrico, as moléculas migram para o polo positivo, pois são carregadas negativamente, e como força oposta à migração existe o atrito com o suporte (gel).

Moléculas maiores promovem maiores atritos com o gel e, portanto, apresentam uma migração mais lenta. A visualização da migração é realizada por meio da revelação do gel na presença de compostos intercalantes, como o brometo de etídio.

• Southern blotting

O Southern blotting é uma técnica que utiliza a capacidade de a nitrocelulose ligar-se fortemente ao DNA fita simples, mas não à fita dupla.

Os passos do Southern blotting são os seguintes:

1º Passo: Clivagem do DNA genômico com enzimas de restrição;
2º Passo: Realização da eletroforese com o DNA genômico total;
3º Passo: Conversão do DNA na sua forma simples pela ação do NaOH;
4º Passo: Transferência das moléculas do gel para a folha de nitrocelulose por capilaridade;
5º Passo: Secagem a 80ºC.
6º Passo: Contato da membrana de nitrocelulose com uma sonda (sequência de DNA conhecida) marcada radioativamente;
7º Passo: Hibridização da sonda à sequência alvo;
8º Passo: Remoção da sonda por lavagem;
9º Passo: Autorradiografia pela exposição a um filme de raio-X.

Answer 2

Para que haja a identificação de uma pessoa através de seu dna são utilizadas sondas capazes de detectar sequências do dna humano.

Espero que tenha ajudado!