Question

1. Descreva o passo-a-passo para a produção de meios de cultura fúngicos.

Answer 1

Resposta:PREPARO DO MEIO DE CULTURA

Para o preparo do meio de cultura, devem ser observados o pH, a pressão osmótica, o grau de umidade, temperatura, como também as exigências nutritivas. Estas incluem fonte de carbono, de sais minerais, de energia, de nitrogênio, de fósforo e, em alguns casos, substâncias que os micro-organismos não podem sintetizar, como vitaminas e aminoácidos.

Materiais

- Água destilada;

- Balança;

- Diferentes meios de cultura;

- Vidraria (placas de Petri, tubos, frascos de vidro – ex.: béquer, erlenmeyer);

- Palito de picolé;

- Papel alumínio ou papel manteiga;

- Copo descartável.

Procedimentos

- Pesar conforme recomendações do fabricante (coletar o meio com o palito de picolé e dispor no papel para pesar na balança);

- Usar vidraria seca e limpa;

- Adicionar os meios em um frasco;

- Acrescentar água para umedecer todo o meio e depois acrescentar o restante da água;

- Após a filtração, antes de acrescentar o Ágar, ajustar o pH do meio;

- Os meios destinados aos tubos devem ser distribuídos;

- Para o meio a ser distribuído em placa, autoclavar em frascos de vidro (esterilização por 15 minutos – temperatura: 121°C);

- Após autoclavar, distribuir nas placas de Petri, inclinando o tubo contendo o meio.

Observações

- Ao preparar um meio de cultura, uma solução não estéril não pode ser mantida a temperatura ambienta por mais de uma hora, devido à possibilidade de evaporação da água como também de crescimento bacteriano, que pode contaminar o meio, alterando a sua composição inicial;

- Para autoclavar, é importante cobrir as tampas dos frascos usando papel alumínio ou papel Kraft e prender para proteger contra recontaminação e evaporação da estocagem posterior. Afrouxar as tampas dos frascos (e dos tubos) com tampas de rosca, permitindo a entrada do vapor (tampas semiabertas);

- Não encha demasiadamente a autoclave, para que não venha a interferir na exaustão de ar e na entrada de vapor;

- Os tubos não precisam estar esterilizados caso o meio seja distribuído antes de autoclavar. Após a autoclavação, as vidrarias e os outros materiais devem ser estéreis para a distribuição do meio;

- Os meios de placa devem ser embalados em filme de plástico PVC a fim de evitar o ressecamento.